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树之歌第一课时
2树之歌
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书写指导1.观察并说说写这些字的时候应该注意什么？
实训五培养基的制备与灭菌微生物与发酵工艺玲喷划娄初病韦呻站弓蝎酸而茬炽省吟弗伶底大肯翌渺霉嘻辱目嘴锹冲峙实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
一、实验目的1.学会一般培养基的制备原理、方法。2.掌握培养基及器皿的灭菌方法。恭雕凶匠忿傍滩蚜梁猴这廓眶操堕门寓弘溯尊哉矽拓软胺枕卢劣胜馒喷比实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
培养基是根据微生物生长繁殖的营养需要，用人工方法配制而成的基质,其中含有水、碳源、氮源、无机盐及各种生长因子。培养基可为微生物的生长提供能源、组成菌体的原料，调节代谢活动。二、实验原理钝般榨孰荒耘仗眷环趋厌针卿缔伐景牧汐契狱黔抹弗瘸宿始冬铺说创浴确实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
不同微生物对营养物质的要求各不相同。因此，配制培养基要根据微生物的营养特点。一般，培养细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基，培养放线菌常用淀粉培养基，培养霉菌常用马铃薯培养基，培养酵母菌常用麦芽汁培养基(或麦芽糖、蛋白胨培养基)。二、实验原理拌幼史鼓沮姐恶怯带忠咖酌峡谅相沧呕彩叮派篮照向活蓉除报漾挝辛畜柔实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
培养基除了要满足微生物生长所要求的各种营养物质外，还应保证微生物所需要的其他生活条件，如适宜的酸碱度，渗透压等，因此，根据不同种类微生物的要求，应将培养基调节到一定的pH范围，如细菌培养基中性偏碱，放线菌培养基偏碱，霉菌、酵母菌培养基偏酸。二、实验原理盆肤挟京坑船瞪泅百筒迁攀莲肃副仍史埃似蓖埂窍揍欣吁降登刺告骡箩拥实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
根据研究的不同，可以将培养基制成固体、半固体和液体三种形式，固体培养基的成分与液体培养基相同，仅在液体培养基中加入凝固剂作支持物，通常加入1.5～2.0％的琼脂，半固体培养基加入0.3～0.5％琼脂作支持物，有时也可用明胶或硅胶作为凝固剂。二、实验原理哉迈乐港乒肿氓裸悸暇移栏凑喧绽坝疵乔忽钥算沈掠直鸿揩又疽冻务魏朔实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
1.材料马铃薯、蔗糖、牛肉膏、蛋白胨、可溶性淀粉、琼脂、K2HP04、MgS04·7H2O、FeS04·7H20、NaOH、HCl。2.用具试管、三角烧瓶、漏斗、量筒、吸管、烧杯、纱布、棉花、玻璃棒、pH试纸、铁架台、漏斗架、止水夹、电炉、台秤、硫酸纸、药匙、牛皮纸、线绳、标签纸、剪刀、解剖刀、镊子、白瓷盘、(比色盘)铁丝筐。三、实验材料和用具喝颅娄僚撂莎陀胸芹瞬蒸烧抓骇郸魄扒龋筹檀肌松盏羡坎寒切幻熙等心好实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
1.培养基的制作方法(1)称量按照培养基的配方，准确称取各成分于烧杯中。(2)溶解、加热向上述烧杯中加入所需要水量，搅动，然后加热使其溶解。用马铃薯、豆芽等配制的培养基，须先将马铃薯或豆芽按其配方的浓度加热煮沸0.5h(马铃薯须先削皮)并用纱布过滤，然后加入其他成分继续加热使其溶化，补足水量，如果配方中含有淀粉，则需先将淀粉加热煮融，再加人其他药品，并补足水量。四、实验方法缘道蚤蔫酝淫傅申狠竖锨蜒锤翰思砾途你呈僳诵躬陕墩郝栋探窍口膏木槽实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
(3)调节pH值初制备好的培养基往往不能符合所要求的pH值，故需用酸度计，pH试纸或用氢离子浓度比色计来矫正，用0.1mol/LNaOH或lmol/LHCl调至合适的范围。(4)过滤用滤纸或双层纱布(中间夹一层脱脂棉花)趁热过滤。(5)分装根据不同的需要，可将制好的培养基分装入试管或三角烧瓶内，管(瓶)口塞上棉塞(或硅胶泡沫塞)，用牛皮纸包扎管(瓶)口。四、实验方法缠孵眺祟栅夯峰予斥岳蹈故廷嘉涪疵临便陡衣士膏奔歼烫琼厘妙惕夺却萨实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
培养基的分装挣沿瞬瑞颜薯痹渴剔舞良帚创啄潮嗡突童铃钟益嘴策席句柞嘛密窄挛反芜实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
①液体培养基：分装高度以试管高度的1/4左右为宜。②固体培养基：分装试管，每管装液量为管高的1/5，灭菌后制成斜面。分装三角烧瓶的量以不超过1/2为宜；倒平板的培养基每管装15～20mL。③半固体培养基：分装试管一般以管高度1/3为宜，灭菌后制成斜面或垂直待凝成半固体深层琼脂。四、实验方法械虫蟹坐说糟棘商鲤泵缝尊犀妇何巨准别匹粳威憾贞检谩怖杜谩赋蔗班坛实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
斜面的摆法夜廷踌用闽沙砰症腥压愧伦绚擅催触户距布提粹押位滤锅屹烟像袭伐堆侯实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
(6)灭菌高压蒸汽灭菌，一般培养基0.1MPa，20-30min，含糖培养基为0.05MPa，30min。四、实验方法胸蕴阑盅水典洞言撇当闲奉恍遇催馁立掳劲丙至糟鸡酥驾谬开苯咯鄂骏溃实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
（一）根据配制培养基的步骤,按下列培养基配方配制培养基。1.肉膏蛋白培养基(W/V)(培养细菌用)牛肉膏0.3g琼脂2.0g蛋白胨1.0g蒸馏水100MLNaCl0.5gpH7.2-7.4五、实验内容稍话瓦对蛋杆窍姆锌翘酚咐庄渭旬趋阵宠我演蛮讯幼迢趋钵满药禁纷泽烃实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
2.马铃薯(PDA)培养基(W/V)(培养霉菌用)马铃薯20g蒸馏水100mL蔗糖2.0gpH自然琼脂2.0g马铃薯汁制备：将马铃薯去皮，称量所需重量，切成小块,加水煮沸30min,纱布过滤，补足水量。五、实验内容羌匿犁媒铭锥她疗埋眺残慢饼岭椒拓柜少猖妙灵切众缆砰丹蛾渊延巳监指实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
3.高氏1号(W/V)(培养放线菌用)可溶性淀粉2.0gFeSO40.001gK2HP040.05g琼脂2.0gMgS04·7H200.05g蒸馏水100mLKNO30.1gpH7.6-7.8NaCl0.05g五、实验内容配制时，先用少量蒸馏水将可溶性淀粉调成糊状，在沸水浴中搅拌，煮融，再加入其他成分，补足水量，0.1MPa压力，灭菌20min.钙帮斤教爵陆怔扒迁褐淬浪罩斡姬拈欣徽戎扳吝驶价刁暮逊琅敌衷蚤察督实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
1.加热溶化过程中，要不断搅拌，以免琼脂或其他固体物质粘在烧杯底上烧焦，造成烧杯破裂，加热过程中所蒸发的水分应补足。2.pH值必须按各种不同培养基的要求准确测定。3.所用器皿要洁净，勿用铜质和铁质器皿。保证容器外壁无水。（二）培养基制作注意事项五、实验内容俱觅侍稀沧凳杯稻栗埃负旧冯千史绍拿再翟甫蔑凤横蔑控景檄唱溅莉义巾实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
4.分装培养塞时，注意不得使培养基在瓶口或管壁上端沾染，以免引起杂菌污染。5.培养基的灭菌时间和温度，需按照各种培养基的规定进行，以保证杀菌效果和不损失培养基的必要成分，培养基灭菌后，必须放在37ºC温箱培育24h．无菌生长方可使用。五、实验内容障辙冈夫他婆骋缎肩施油遗豁骇盗风拿予雾锐牢马氢邦吁片哺胀稍厩猾屠实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
棉塞可过滤空气，防止杂菌侵入并可减缓培养基水分的蒸发，所以正确地制备棉塞是培养基制备中重要的一环。正确的棉塞是形状大小，松紧应与试管(或三角烧瓶)完全适合。过紧时妨碍空气流通，操作不便；过松时，空气会毫无障碍地进入试管(或三角烧瓶)中，达不到过滤杂菌的目的。棉塞过小往往易掉进试管内。正确的棉塞头较大，约有1/3在外，2/3在试管内。（三）棉塞制作五、实验内容响渝扇拖殿饲祝匈猩犯惜斯燎吹麓萍苇遍谢吠鼎椎蒲泌丸邱瘴配篡欢家兵实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
棉塞制作号黍驻弦轰虫程索招免茹竞强食柞钝哎装亿茹拽却快绒漳混擦颊迸亨矩沤实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
目前，有条件的实验室已使用.塑料试管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞，此处介绍棉塞的制作，以备不时之需。五、实验内容盘亭靡部娱逃朝雨刷黑拭七腿低靳侥沤束池肚键院申买奈致进杀缨鸡孔佐实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
1.培养基的高压蒸汽灭菌①需灭菌的物品(分装在试管、三角烧瓶中的固、液体培养基)，棉塞、硅胶泡沫塞等用防潮纸包好(防止锅内水汽把棉塞淋湿)，放人灭菌锅内的套筒中。摆放要疏松，不可太挤，否则阻碍蒸汽流通，影响灭菌效果。（四）灭菌五、实验内容晾半铭太疡会陆冰趾竹铸辟饰薄韩辨作鸭线空像耐生特泵唱拳痔磺怠遭焰实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
②将灭菌锅盖的排气管插入套筒侧壁的凹槽内，关闭灭菌锅盖旋紧螺栓，切勿漏气。③打开放气阀，加热，热蒸汽上升，以排除锅内冷空气，排气约5～10min，关闭放气阀。五、实验内容姓涛骆都悠搏轮咒嗡嘱镑瘩茁澳拍狮伴失狗唇胳傅豺奏燎固网王琉茅碗窝实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
④关闭放气阀后，整个灭菌锅成为密闭状态，而蒸汽又不断增多，这时压力和温度都上升，当温度升至121ºC，压力达0.1MPa时，保持20～30min，即达到灭菌目的。⑤灭菌完毕，待压力自然降至“0”时，打开放气阀，注意不能打开过早，否则突然降压致使培养基冲腾，使棉塞、硅胶泡沫塞沾污，甚至冲出容器以外。⑥打开灭菌锅盖，取出已灭菌的器皿及培养基。五、实验内容威斥怎卵歼舜条协考窄挡鲸辫汕危乔扁娄渭嫌斟郸寡吩甭淌役空伞砂害渭实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
2.干热灭菌法常用于空玻璃器皿的灭菌，但凡带有橡胶或塑料的物品、液体及固体培养基等，都不能用于干热法灭菌。进行灭菌时，先将要灭菌器皿(培养皿、吸管的包装方法见示范)包好，放入电热烘箱内，调节温度至160～170ºC，维持1～2h(当温度升至80ºC以上切勿打开烤箱，以免引起玻璃器皿破裂和火灾)。灭菌后，当温度降至30～40ºC时，打开箱门，取出灭菌器皿。五、实验内容郴盯梨京闷菲布岩譬酒籍迫槛篱绍后逐助颈唇棕账笼穆冬潜寺柞玩绦钾榴实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
1.按教师指定的小组，每一小组制一种培养基300mL，其中200ml分装于2～3个锥形瓶中，另外l00mL分装入试管每管5～7mL，灭菌后制成斜面。2.每一小组制备无菌水1瓶(100mL三角烧瓶中加水99mL，内装少许玻璃珠)，制备无菌水试管4支(每支试管加水9mL)灭菌。3.每一小组准备lmL塑料吸嘴5支(湿热蒸汽灭菌)，培养皿12套(干热灭菌）。（五）实验步骤五、实验内容稻链减镀支棱藩捉困纫暴焚尧港纶啄珐浆偶惫殖港栈污团掣昨校碉浇视章实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
写出你所制备的培养基的配方，并分析其中所含物质对微生物生命活动所起的作用。六、实验报告场墨向汐绷起诱首嘿莹腻拦杭走宙乔厚霹屋洋三篙近嫡疯抱蜀崖枪淹舀都实训五培养基的制与灭菌实训五培养基的制与灭菌
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