资料简介
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植物体细胞杂交过程示意图
复习旧知识2.2.2 动物细胞融合
与单克隆抗体A细胞 B细胞
人工诱导
1.1动物细胞融合的概念
杂交细胞
动物细胞融合(也称细胞杂交):是
指两个或多个细胞融合形成一个单核细
胞的过程。
一、动物细胞融合
两个核的融合是在杂种细胞第
一次有丝分裂时进行的
杂交细胞遗传物质特点:
含两种生物的遗传物质诱导方法:
物理方法:
化学法:
生物法: 灭活的病毒
(动物特有)
电激等
聚乙二醇(PEG)灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通
细胞膜连接
细胞融合,形成杂交细胞
原理: 细胞膜具有一定的流动性•为什么灭活的病毒能作为诱导剂?
因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分
子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细
胞发生融合。
•不灭活的病毒能作为诱导剂吗?
不能,因为不灭活的病毒会感染细胞。植物细胞杂交与动物细胞融合的比较
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理
融合前处理
使用的酶
诱导方法
主要用途
细胞膜的流动性
细胞的全能性 细胞膜的流动性
纤维素酶、果胶酶 胰蛋白酶
物理方法
(离心、振荡、电激)
化学方法(PEG)
物理、化学方法
灭活的病毒
获得杂种植株 制备单克隆抗体
去除细胞壁后诱
导原生质体融合
使细胞分散后
诱导细胞融合4.意义:
突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂
交(种间、属间、科间、动植物之间)成
为可能。
5.应用:
最重要的用途是
制备单克隆抗体• 单克隆抗体:单个B细胞克隆产生的化学性
质单一、特异性强的抗体提示1:对B细胞进行细胞培养可行吗?
提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的?
问题:如何大量生产单克隆抗体?请尝试设
计一个方案。
2.2单克隆抗体的制备一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体
骨髓瘤细胞能无限增殖
杂交瘤细胞动物细胞培养技术
设计方案:
动物细胞融合技术单克隆
抗体
既能产生特异性抗体,
又能大量增殖的细胞
1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验骨髓瘤细胞免疫小鼠免疫小鼠
单克隆抗体单克隆抗体
筛选
克隆、筛选
体内培养
体外培养
已免疫过的
B淋巴细胞
(浆细胞)
(选择培养基)
(抗体检测)
细胞融合
杂交细胞杂交细胞
杂交瘤细胞杂交瘤细胞
原理:
细胞膜具
有一定的
流动性和
细胞增殖BB 、B瘤 、瘤瘤
(B、瘤)
(一选)目
的:选出杂
交瘤细胞
获得产生相应
抗体的B细胞
(二选)目的:
选能产生所需
特异性抗体的
杂交瘤细胞
√
体外培养体外培养
小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养2、单克隆抗体的优点
特异性强、灵敏度高3、单克隆抗体的应用
(1)作为诊断试剂——最广泛应用
准确、高效、简易、快速
(如同位素标记
单克隆抗体,可
诊断肿瘤、心血
管畸形等)(2)运载药物
生物导弹=单克隆抗体+药物,治疗肿瘤)
(“(“生物导弹生物导弹” ” ——单抗导向,药物为弹头单抗导向,药物为弹头))1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,
经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是(
)
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞
C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的B淋巴细胞
A
2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中,正确的是(
)
A. 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同
C. 操作步骤基本相同 D. 都能形成杂种细胞
D3. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是( )
A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合
B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成
C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成
D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成
D
4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是( )
A.PEG B.灭活的病毒 C.电刺激 D.离心
B(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自小鼠
体内的 细胞,从小鼠体内提取分离该细胞之
前,应给小鼠注射_____________类物质。
(2)d过程是一个_____________过程,该过程的进
行常用_____________或_____________的诱导。
(3)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成 种
类型的C细胞,因此需用__________培养基筛选出D细胞
用于培养,D细胞的名称是 ,其特点是
_________________________________________。
效应B
抗原
细胞融合
聚乙二醇 灭活的病毒
选择性
3
既能无限增殖又能产生特异性抗体
杂交瘤细胞(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细
胞体外培养需要注意的条件是(要求答5项)
__________________________________。
(5)单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面,
与常规抗体相比,其特点是_________________。特异性强、灵敏度高
有丝
无菌、无毒的环境;充足的营养;适宜的温度和pH;适宜的气体环境
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