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(1) (1) (2) (3) (4) (5) 植物体细胞杂交过程示意图 复习旧知识2.2.2 动物细胞融合 与单克隆抗体A细胞 B细胞 人工诱导 1.1动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合(也称细胞杂交):是 指两个或多个细胞融合形成一个单核细 胞的过程。 一、动物细胞融合 两个核的融合是在杂种细胞第 一次有丝分裂时进行的 杂交细胞遗传物质特点: 含两种生物的遗传物质诱导方法: 物理方法: 化学法: 生物法: 灭活的病毒 (动物特有) 电激等 聚乙二醇(PEG)灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合,形成杂交细胞 原理: 细胞膜具有一定的流动性•为什么灭活的病毒能作为诱导剂? 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分 子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细 胞发生融合。 •不灭活的病毒能作为诱导剂吗? 不能,因为不灭活的病毒会感染细胞。植物细胞杂交与动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 原理 融合前处理 使用的酶 诱导方法 主要用途 细胞膜的流动性 细胞的全能性 细胞膜的流动性 纤维素酶、果胶酶 胰蛋白酶 物理方法 (离心、振荡、电激) 化学方法(PEG) 物理、化学方法 灭活的病毒 获得杂种植株 制备单克隆抗体 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 使细胞分散后 诱导细胞融合4.意义: 突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂 交(种间、属间、科间、动植物之间)成 为可能。 5.应用: 最重要的用途是 制备单克隆抗体• 单克隆抗体:单个B细胞克隆产生的化学性 质单一、特异性强的抗体提示1:对B细胞进行细胞培养可行吗? 提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的? 问题:如何大量生产单克隆抗体?请尝试设 计一个方案。 2.2单克隆抗体的制备一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖 杂交瘤细胞动物细胞培养技术 设计方案: 动物细胞融合技术单克隆 抗体 既能产生特异性抗体, 又能大量增殖的细胞 1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验骨髓瘤细胞免疫小鼠免疫小鼠 单克隆抗体单克隆抗体 筛选 克隆、筛选 体内培养 体外培养 已免疫过的 B淋巴细胞 (浆细胞) (选择培养基) (抗体检测) 细胞融合 杂交细胞杂交细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞 原理: 细胞膜具 有一定的 流动性和 细胞增殖BB 、B瘤 、瘤瘤 (B、瘤) (一选)目 的:选出杂 交瘤细胞 获得产生相应 抗体的B细胞 (二选)目的: 选能产生所需 特异性抗体的 杂交瘤细胞 √ 体外培养体外培养 小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养2、单克隆抗体的优点 特异性强、灵敏度高3、单克隆抗体的应用 (1)作为诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 (如同位素标记 单克隆抗体,可 诊断肿瘤、心血 管畸形等)(2)运载药物 生物导弹=单克隆抗体+药物,治疗肿瘤) (“(“生物导弹生物导弹” ” ——单抗导向,药物为弹头单抗导向,药物为弹头))1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞, 经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( )   A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的B淋巴细胞 A 2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中,正确的是( ) A. 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C. 操作步骤基本相同 D. 都能形成杂种细胞 D3. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是( ) A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D 4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是(   ) A.PEG   B.灭活的病毒   C.电刺激 D.离心 B(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自小鼠 体内的 细胞,从小鼠体内提取分离该细胞之 前,应给小鼠注射_____________类物质。 (2)d过程是一个_____________过程,该过程的进 行常用_____________或_____________的诱导。 (3)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成 种 类型的C细胞,因此需用__________培养基筛选出D细胞 用于培养,D细胞的名称是 ,其特点是 _________________________________________。 效应B 抗原 细胞融合 聚乙二醇 灭活的病毒  选择性   3 既能无限增殖又能产生特异性抗体 杂交瘤细胞(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细 胞体外培养需要注意的条件是(要求答5项) __________________________________。 (5)单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面, 与常规抗体相比,其特点是_________________。特异性强、灵敏度高 有丝 无菌、无毒的环境;充足的营养;适宜的温度和pH;适宜的气体环境 查看更多

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