资料简介
专题2 细胞工程植物细胞工程
动物细胞工程
细
胞
工
程
动物细胞培养
体细胞核移植技术
与克隆动物
动物细胞融合
单克隆抗体
过程
条件
应用
概念
过程
应用前景
概念
过程
应用
植物组织培养
植物体细胞杂交技术
原理、过程
过程、概念、优势原
生
质
体
番
茄
细
胞
原
生
质
体
融
合
再
生
出
细
胞
壁
杂
种
细
胞
脱
分
化
愈
伤
组
织
杂
种
植
株
再
分
化
植物体细胞杂交技术（重点 理解）：
11、过程：、过程：
马
铃
薯
细
胞
标志：成功融合
人工诱导
去壁
植物组织培养植物组织培养植物细胞的融合植物细胞的融合
酶解法（纤维素酶、酶解法（纤维素酶、
果胶酶等）果胶酶等）
物理法：离心、振动、物理法：离心、振动、
电刺激等电刺激等
化学法：聚乙二醇（化学法：聚乙二醇（PEGPEG））五、动物细胞培养
从动物机体中取出相关的 ，将它分散成
，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞
。
1概念：
动物胚胎或
幼龄动物的组织、器官
如：肾、肺等
细胞生命力旺盛，分裂能力强
原理：细胞增殖
使细胞和培养液充分接触
组织
单个细胞
生长和增殖2、过程：
取什么样的组织？
如何将组织分散成单个细胞？
如何制备细胞悬液？
什么叫原代培养？
什么叫传代细胞培养？
如何进行传代培养？
什么是细胞贴壁现象？
什么是细胞接触抑制
取幼龄组织或器官
如：肾脏 肌肉
用胰蛋白酶处理
加入细胞培养液
细胞贴壁：
培养过程中，
细胞贴附在瓶
壁上的现象。
要求：培养瓶
或培养皿的内
表面光滑、无
毒
细胞接触抑制
细胞在贴壁生长
过程中，随着细
胞分裂，数量不
断增加，最后形
成一个单层，此
时细胞间相互接
触，细胞分裂和
生长停止，数量
不再增加。
原代培养：从机
体取出后立即培
养的细胞。
10代以内
用胰蛋白酶分散成单个细胞
传代培养：分
瓶后的培养，从
10代培养到40
－50代细胞(动物胚胎或幼龄动物组织)
取动物器官
和组织
剪碎组织
胰蛋白酶处理
原代培养
原理：细胞增殖（有丝分裂）
制成细胞悬液
传代培养
（特征：
细胞贴壁
接触抑制）
一、动物细胞培养3、条件：
1、无菌、无毒的环境
2、营养
3、温度和PH
4、气体环境：
（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
补充合成培养基
中缺乏的物质
36.5 +0.5度 ；PH为7.2-7.4。
O2作用：进行 呼吸，提供能量
CO2作用：维持培养液的PH值（95%空气和5% CO2 ）
（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。）
有氧•（1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干
扰素、单克隆抗体等。
•（2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。
•（3）用于检测有毒物质
•（4）用于生理、病理、药理等方面的研究，
为治疗和预防疾病提供理论依据
4、应用5．(2010·潍坊模拟)下列关于动物细胞培养的叙述，
正确的是( )
A．培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体
B．培养中的人B细胞能够无限地增殖
C．人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株
D．用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞
D6．(2010·浙江理综，4)下列关于动物细胞培养的叙述，
正确的是 ( )
A．培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细
胞
B．克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变
C．二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
D．恶性细胞系的细胞可进行传代培养
D 7．动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在
于( )
A．培养基不同
B．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能
D．动物细胞能够大量培养，而植物细胞不能
A比较：
培养结果
培养目的
培养基特有成分
培养基性质
原理
比较项目
细胞的全能性
植物体或组织
快速繁殖、培育
无病毒植株等
蔗糖、植物激素
固体培养基
植物组织培养
细胞株、细胞系
获得细胞
或细胞分泌蛋白
葡萄糖、动物血清
液体培养基
细胞增殖
动物细胞培养7．(2009年高考浙江理综卷)用动、植物成体的体
细胞进行离体培养，下列叙述正确的是 (
)
A．都需用 CO2培养箱
B．都须用液体培养基
C．都要在无菌条件下进行
D．都可体现细胞的全能性
C1、概念：
六、动物细胞融合
两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。
原理：
结果：
细胞膜的流动性
得到杂交细胞
诱导方式诱导方式
物理法：物理法：
化学法：化学法：
生物法：生物法： 灭活的病毒灭活的病毒((与植物细胞杂交不同与植物细胞杂交不同
点点))
离心、振动、电刺激；离心、振动、电刺激；
聚乙二醇；聚乙二醇；
2、诱导融合的方法：植物、动物细胞融合的比较
主要用于制备主要用于制备
单克隆抗体单克隆抗体获得杂种植株获得杂种植株用途用途
物理、化学方法物理、化学方法
（同左）（同左）
灭活的病毒灭活的病毒
物理（离心、物理（离心、
振动、电刺激）振动、电刺激）
化学（聚乙二醇）化学（聚乙二醇）
诱导方法诱导方法
使细胞分散后诱使细胞分散后诱
导细胞融合导细胞融合
去除细胞壁后诱去除细胞壁后诱
导原生质体融合导原生质体融合细胞融合的方法细胞融合的方法
细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、
植物细胞全能性植物细胞全能性原理原理
动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交比较项目比较项目1、概念：
单克隆：一个细胞经过无性繁殖（多次有丝分裂），
形成一个细胞群，叫做一个克隆，即单克隆。
单克隆抗体：由一个效应B细胞经过无性繁殖形成
一个细胞群产生的化学性质单一，特异性强的抗体，
叫单克隆抗体。
八、单克隆抗体2010-3-26 17
B淋巴细胞
注射特定
抗原蛋白
骨髓瘤细胞
培养骨髓瘤细胞
融合
（只考虑两两融合）
培养液中融合细胞
几种类型？
骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞
B淋巴细胞--- B淋巴细胞
B淋巴细胞---骨髓瘤细胞
多种杂交细胞
在具有筛选作用的培养基上培养
专一抗体检验阳性
克隆上述杂交细胞
分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，
检验阳性细胞
单克隆抗体
注射到小鼠体内 体外培养
2、单克隆抗体的制备过程
第第11次筛选目的：得到杂次筛选目的：得到杂
交瘤细胞（多种）。交瘤细胞（多种）。
第第22次筛选目的：在杂次筛选目的：在杂
交瘤细胞中筛选出能产交瘤细胞中筛选出能产
生所需抗体的杂交瘤细生所需抗体的杂交瘤细
胞。胞。
该细胞继承双亲细胞
的遗传特性，既能产生专
一抗体又能无限增殖。
杂交瘤细胞有何特点？
特异性强，灵敏度高【堂堂清】
1.单克隆抗体的优点是
________________________________特异性强、灵敏度高、可大量制备
2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的
原因是
_________________________________每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体
3.产生抗体的细胞是_______________
产生单克隆抗体的细胞是__________
效应B细胞（浆细胞）
杂交瘤细胞(2008年上海生物)制备单克隆抗体所采用的
细胞工程技术包括 ( )
. ①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植
④细胞核移植
. A．①② B．①③
. C．②③ D．③④1．下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
(1) 技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于
培养基。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是
。
(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用诱导剂外，
还可以采用 。
(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的 特点，又
具备淋巴细胞的 特点。
(6)淋巴细胞是由动物体 中的 细胞分化、发育而来。
(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是
。
动物细胞培养
选择
特异性强，灵敏度高
灭活的病毒
在体外大量增殖
分泌特异性抗体
骨髓 造血干细胞
主动运输 1、概念：
六、动物细胞核移植和克隆动物
将一个动物的细胞核，移入另一个
去核的卵母细胞中，使其重组发育成一
个胚胎，最终发育成动物个体。
结果：
原理：
分类：
克隆动物(用核移植方法得到的动物)
动物细胞核的全能性
胚胎细胞核移植、体细胞核移植卵细胞
Ａ母绵羊 Ｂ母绵羊
乳腺细胞
细胞质 细胞核
细胞核移植
重组胚胎
卵裂
C母绵羊子宫
胚胎移植
多莉羊
分娩妊娠
多
莉
羊
的
培
育
过
程
重组细胞
结论：动物体细胞核具全能性2、动物体细胞核移植的过程
供体细胞
（供核）
细胞培养 体细胞
卵母细胞
（减Ⅱ中期：供质）
去核 无核卵
母细胞
核移植杂种
细胞
早期胚胎
胚胎移植
代孕母体新个体
分娩
激活
卵裂3克隆动物的研究意义
1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白
2.改良动物品种
3.治疗人类疾病，作为供体
4.保护濒危动物
体细胞核移植技术存在的问题：
许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，
如体型过大，异常肥胖，发育困难，脏
器缺陷，免疫失调等。
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