资料简介
动物细胞培养
富县高级中学:张荣
一、动物细胞培养的应用和概念:
1
、概念:
动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关的
组织
,
将它分散成
单个细胞
,
然后
,
放在适宜的
培养基
中
,
让这些
细胞生长和增殖
.
2
、原理:
细胞增殖
定义:
人们通常将动物组织
消化后
的
初次培养
称为原代培养。
胰蛋白酶处理
取出组织
胚胎或幼龄动物器官组织
剪碎
单个细胞
细胞悬液
转入培养瓶内培养 (
贴壁生长
长成单层细胞。有
接触抑制
现象)
。
①
原代培养
3
:过程
图示
原代培养
强调一:细胞贴壁过程
■
细胞贴壁:
在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。
■
培养瓶或培养皿壁要求:
表面光滑、无毒、
易于贴附。
■
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时
,
细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。
强调二:接触抑制
定义:
当原代培养的细胞处于
接触抑制后
,
用
胰蛋白酶
处理
,
使细胞从瓶壁上
脱离
下来
,
然后加入新的培养液
,
将
细胞分离稀释
,
并
从原培养瓶内转接到新的培养瓶内
,
这个过程称
传代培养
.
(
分瓶培养的过程
)
②
传代培养
▲
细胞株:传代细胞一般能传到
40-50
代,
遗传物质一般不会发生改变
,叫细胞株。
细胞系、细胞株(
了解即可
)
▲
细胞系:传代
50
代以后不能再传下去,部分细胞
遗传物质发生了改变
,能连续传代,获得不死性,叫细胞系。
3
、总结:动物细胞培养过程
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
配置细胞悬液
剪碎用胰蛋白酶处理
10
代细胞
转入培养瓶
40-50
代细胞
传代培养
无限传代
单个细胞
加培养液稀释
传代
10
代以内,
遗传物质不改变,保持
正常
二倍体核型
。
传代
10-50
代左右,增长缓慢以至于完全停止,
部分细胞核型可能发生变化
(遗传物质可能改变
)
为什么用胰蛋白酶处理?
分瓶
传代培养
原代培养特点:
细胞贴壁、接触抑制
继续传代培养少部分细胞
获得不死性
,
细胞突变
,
遗传物质已经改变
,
等同于癌细胞
。
细胞株:
一般说遗传物质未改变
细胞系:
遗传物质已改变
原代培养
4.
动物细胞培养的条件
:
1
)无菌无毒 的环境:
适宜的温度:
人和哺乳动物细胞最适温度为
36.5
±
0.5℃
。
适宜的酸碱度:
PH
:
7.2-7.4
液体合成培养基:(
糖、氨基酸)、促生长因子、(水、无机盐、微量元素)
等;通常还需加入
血浆、血清等
天然成分。
4
)气体环境:
2
)营养:
3
)温度和
pH
:
“95
%空气
+5
%
CO
2
”
的混合气体培养箱。
氧
气是细胞代谢必须的;
CO
2
维持培养液的
PH
。
对培养液和所有培养用具
无菌处理;
培养液中
添加抗生素
防止培养过程中污染;
定期更换培养液
以清除代谢产物,防止对培养细胞造成危害。
细胞的全能性
细胞或细胞产物
新个体或细胞产物
培养结果
获得细胞
或细胞产物
快速繁殖、培育无病毒植株等
培养目的
葡萄糖、动物血清
蔗糖、植物激素
培养基特有成分
液体培养基
固体培养基
培养基性质
细胞增殖
原理
动物细胞培养
植物组织培养
比较项目
植物组织培养和动物细胞培养的比较
5.
动物细胞培养技术的应用
:
1.
蛋白质生物制品的生产
如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体
2.
应用于基因工程
主要用于作为受体细胞
3.
检测有毒物质,判断某种物质的毒性
4.
细胞的生理、药理、病理研究
如用于筛选抗癌药物
1.
动物细胞工程技术的基础是:( )
A
.动物细胞融合
B
.胚胎移植
C
.动物细胞培养
D
.核移植
C
课堂练习
;
2.在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是( )
A
.结果是相同的
B
.杂种细胞的形成过程基本相同
C
.操作过程中酶的作用相同
D
.诱导融合的手段相同
B
再见
查看更多